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长白猪IL-4基因克隆及真核表达载体的构建

长白猪IL-4基因克隆及真核表达载体的构建

ISSN:1673-5358
2010年第27卷第11期
猪群保健
王彬,汤德元,李春燕,曾智勇,王凤,甘振磊,周厚品
贵州大学动物科学学院,贵州,贵阳,550025

将长白猪外周血淋巴细胞在刀豆素A(ConA)的刺激下培养24 h后,提取其总RNA,应用RT-PcR技术扩增白细胞介素-4(IL-4)cDNA,克隆到pMD19-T载体并测序.将构建好的载体双酶切并回收目的片段与pcDNA3.1(+)载体连接并转化入Top10中构建真核表达载体,真核表达载体经双酶切及测序结果表明:克隆的IL-4 cDNA全长为411个碱基,其中ORF为402个碱基,编码133个氨基酸,与GenBank公布的猪IL-4比对同源性为100%,从而证实成功构建了长白猪IL-4 cDNA真核表达载体.

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ISSN:1673-5358
2010年第27卷第11期
猪群保健

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