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氮离子诱变筛选内切葡聚糖酶高产菌株及其基因突变研究
Studies on Endoglucanase Activity and Gene Mutation of Bacillus subtilis Induced by Nitrogen Ion Irradiation

氮离子诱变筛选内切葡聚糖酶高产菌株及其基因突变研究

ISSN:1004-311X
2010年第20卷第4期
吕杰[1],金湘[2],马媛[3],毛培宏[4],虞龙[5],应汉杰[5] LV Jie[1],JIN Xiang[2],MA Yuan[3],MAO Pei-hong[4],YU Long[5],YING Han-jie[5]
  1. 新疆大学,物理科学与技术学院,核技术及其应用技术中心,新疆,乌鲁木齐,830008;南京工业大学,生物与制药工程学院,江苏,南京,210009
  2. 新疆大学,物理科学与技术学院,核技术及其应用技术中心,新疆,乌鲁木齐,830008
  3. 新疆大学,资源与环境科学学院,绿洲生态教育部重点实验室,新疆,乌鲁木齐,830046
  4. 新疆大学,物理科学与技术学院核技术及其应用技术中心,新疆,乌鲁木齐,830008
  5. 南京工业大学,生物与制药工程学院,江苏,南京,210009

目的:离子注入枯草芽孢杆菌筛选高产内切葡聚糖酶突变菌株,同时进行其酶活性研究,并克隆该基因,研究离子注入对其诱变效应。方法:低能氮离子重复注入枯草芽孢杆菌,筛选获得1株高产内切葡聚糖酶突变菌株Bac11。DNS法测定酶活性。PCR扩增获得出发菌株Bac01和突变菌株Bac11内切葡聚糖酶基因,并对核酸序列及预测氨基酸序列进行多重比对。结果:突变菌株Bac11内切葡聚糖酶活性从93.33IU提高到381.89IU。多重比对Bac01和Bac11内切葡聚糖酶基因编码区1500bp序列,当中有10个碱基发生突变,预测氨基酸序列中有5个氨基酸残基发生变化,且都在其基因纤维素结合域部分。结论:低能氮离子重复注入对枯草芽孢杆菌内切葡聚糖酶活性及其基因有明显的诱变累加效应。

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ISSN:1004-311X
2010年第20卷第4期

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