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利用同序异尾限制性内切酶快速克隆多基因片段的新方法

利用同序异尾限制性内切酶快速克隆多基因片段的新方法

ISSN:1000-3282
2006年第33卷第6期
技术与方法
杜广营,朱乃硕 DU Guang-Ying,ZHU Nai-Shuo
复旦大学生命科学学院病毒与分子免疫实验室,复旦金鹰生物医药研发中心,上海,200433

介绍一种可以快速进行多基因片段克隆的新方法——同序异尾限制性内切酶(isoschizomer-heterotailrestrictionendonuclease,IHRE)一步克隆法,该方法可以一步完成多达6个DNA片段的连接,具有简单快速、节省试剂、成功率高、不引入非目的基因序列等很多优点.应用该方法已经成功完成对人肠激酶轻链多基因克隆、HSV多表位DNA疫苗的构建等.

A novel method for quickly cloning genes with multiple DNA fragments--one step cloning technique using isoschizomer-heterotail restriction endonuclease (IHRE) is described. Up to six DNA segments are ligated by using only one restriction endonuclease in this method. Comparing with routine method,it is simple, fast, economical and generates products with higher purity and achievement. Light chain of human enterokinase, DNA multi-epitope vaccine to HSV2 have been designed and successfully constructed via this method.

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ISSN:1000-3282
2006年第33卷第6期
技术与方法

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